概述
• 下一代“专家级”流式细胞仪,代表了未来流式技术的发展方向。
• 能完成所有传统流式细胞仪功能,并且在荧光灵敏度和细胞分辨率等主要性能指标方面明显优于其它传统流式细胞仪。
• 不仅可以对细胞群体分析还可以提供个体细胞的形态学影像,准确的影像学判定,实现了眼见为实的圈门独有应用,精确界定细胞边界,提供更为精准的流式数据。
• 具备升级潜能,升级后可提供独特应用,凋亡、周期、内吞、核转位等等,实现了从表型分析到细胞功能的华丽转身。
系统
FlowSight具有12个检测通道,最多可配置5个激光器,支持高灵敏度的10个荧光探针同时检测。更多设想周到的细节设计,如专门配置的785 nm散射光激光器,激光功率可调,明视野图像直接测定细胞大小等等,使得FlowSight在细胞群的区分能力方面,比其他昂贵的常规流式细胞仪更加强大。FlowSight简单易用,性能出色以及具备每个细胞的成像功能,能同时满足初学者以及专家的需求,应用范围非常广阔。
图像量化分析功能(QI)升级,包括光学系统、计算机系统和软件系统的强化,大大提高了FlowSight图像获取和分析能力。同时QI也整合了功能强大而且直观的图像处理包,内含超过百种量化分析参数和多种基于图像分析应用的优化分析向导,应用于核转位、形变、内吞、细胞凋亡等分析。
独有的专利技术设计使得FlowSight在各个荧光通道都具有小于10MESF的超高荧光灵敏度。
FlowSight 在混合细胞样品分群方面具有卓越的表现。
FlowSight 是唯一一种将流式细胞仪和12通道图像检测结合起来的仪器。多检测通道的搭配,更多的激光器选择以及自动荧光补偿功能,使复杂的细胞分群变得更加简单。
参数
• 检测通道:标配12个检测通道—2个明场、1个暗场(侧向角散射)和最多10个荧光图像。
• 激光器:激发—488 nm标配;可选:405、561、642 nm
• 侧向角散射—785 nm标配
• 明场—固定的1/9通道标配,可选多通道
• 图像采集:20倍放大率,数值孔径0.6,1 μm像素
• 荧光检测灵敏度:小于10 MESF
• 上样体积:20-200 μl
• 动开机、消毒、关机
• 自动进样,获取数据以及图像
• 自动激光校正,调焦,校准以及自我校正
流程
应用
细胞周期分为间期(G1、S和G2)和有丝分裂期(细胞分裂阶段,M)。M期又分为前、中、后、末四期。细胞周期分析是流式细胞术最常见的应用之一。FlowSight只要利用DAPI染料标记核酸,根据DNA的凝集情况就可以利用细胞图像对细胞周期进行精确分析;同时还可以突破传统流式的应用限制,进一步将M期分为四期。
传统的流式细胞仪利用膜渗透性染料识别已经死亡和发生凋亡而失去膜完整性的细胞。但是,很难确定细胞死亡是通过凋亡的途径还是坏死。而FlowSight通过分析每个细胞核形态差异,可以解决这个问题。
图像量化分析功能升级后包含核转位程度的检测向导,可识别任意标记的信号分子在细胞质和细胞核之间的转位过程。
细胞发生自噬时,作为标记物的细胞质LC3蛋白经过加工在自噬体外膜表面大量聚集。利用IDEAS软件中的Spot Count形态学量化参数,能够在直观观察LC3荧光斑点的同时,准确统计每个细胞内LC3斑点的数量,从而对细胞自噬状态进行量化分析。
文献
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